测小鼠IL-1B!急
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发布时间:2009-09-20 08:42:16
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我需要具体实验步骤,“非常详细”的操作。包括取血液等。写上器材等。如果是随便找的粘贴的,请不要写。谢谢!在线等!
用ELISA法
>>>>>>>>休闲养生网回答:休闲 居 编 辑
双抗夹心ELISA法。IL-1b单抗包被于酶标板上,标本中的IL-1b会与单抗结合。加入生物素化的抗IL-1b(二抗),它将与结合在单抗上的IL-1b结合而形成免疫复合物,未结合的将被洗去。辣根过氧化物酶标记的Streptavidin 将与二抗的生物素结合,多馀的物质会被洗掉。加入TMB显色。IL-1b的浓度与OD(450nm)成正比。
酶标板(Coated Wells) 96wells Anti-IL-1b Biotin 2 vial
浓缩洗涤液(100X)(Washing Concentrate) 10ml 标准品(Standards) 2 vial
显色液(TMB Substrate) 12ml 标准品稀释液(Standard Diluent) 15ml
终止液(Stop Solution) 12ml 浓缩酶联物(HRP) 2 vial
酶联物稀释液(HRP Diluent) 15ml 生物素稀释液(Biotin Diluent) 15ml
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要但未提供的材料
1. 可在450nm处进行读数的酶标仪;
2. 能精确吸取10-200?L的移液器;
3. 可调多道(8)移液器(50-200?L);
4. 供可调多道移液器使用的试剂存放槽;
5. 洗瓶或洗
机;
6. 蒸馏水或去离子水;
7. 1升的圆柱形量筒;
8. 移液器:1和(10或25 mL);
9. 移液器枪头;
10. 纸巾;
11. 计时器,用以监控温育步骤;
12. 处理池和消毒剂(例如:0.5% 次氯酸钠, 10% 家用漂白水);
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